芥酸是菜子油中一種二十二碳單不飽和脂肪酸,含20%~50%,對人體有一定毒性。芥酸檢測方法有氣相色譜法。
1.儀器
GC儀(具氫火焰檢測器)。
2.試劑
①石油醚。
②甲醇。
③無水Na2SO4。
④飽和NaCl液。
⑤二十三烷酸甲酯(1mg·mL-1):石油醚配制。
⑥芥酸甲酯(1mg·mL-1):石油醚配制。
3.儀器工作條件
①玻璃色譜柱:(1.85m×2mm),內填10%EGA的Chromosorbw(80~100目)。
②柱溫215℃,進樣口溫度250℃,檢測器溫度250℃。
③載氣[N2(99.99%),流速40mL/min]。
④進樣量2μL。
4.檢測步驟
取1g樣品于磨口錐形瓶中,加二十三烷酸甲酯1mL,加石油醚10mL,加玻璃珠5粒,接上冷凝裝置,在沸水浴中回流30min,回收石油醚,用N2吹干。加5mL石油醚溶解殘渣,在沸水浴中回流2min,冷卻,加飽和NaCl液至溶劑層上升至瓶頸處,用無水Na2SO4脫水,待檢。取2μL溶液注入GC儀(同時分別取二十三烷酸甲酯標準液及芥酸甲酯標準液各2μL導人GC儀),記錄各自峰面積(mm2)。
二十三烷酸甲酯內標定量。
菜子油中芥酸含量=[(A1×m2×f)/(A2×m1×1000)]×100%
式中:A1——樣液中芥酸甲酯峰面積,mm2;
A2——樣液中十二、十三烷酸甲酯峰面積,mm2;
m2——二十三烷酸甲酯含量,mg;
m1——樣品質量,g;
f——標準液中芥酸甲酯和二十三烷酸甲酯峰面積與相應的標準脂肪酸重量之間的校正因子。