1．儀器
分光光度計(jì)。
2．試劑
6)95％乙醇。
②濃H2SO4、5％H2SO4、1％H2SO4。
③NH3H2O液。
④l％甲醛液。
⑤冰乙酸。
⑥馬鈴薯毒素標(biāo)準(zhǔn)液(1mg·mL)：稱取馬鈴薯毒素標(biāo)準(zhǔn)品0．1000g于1．0mL容量瓶中，用1％H2SO4溶解并定容至刻度。
3．檢測(cè)步驟
取50g樣品于索氏提取瓶中，加100mL乙醇、3mL冰乙酸，在水浴上回流16h，回收乙醇，待溶液剩10mL左右，轉(zhuǎn)入蒸發(fā)皿中，蒸去乙醇至近干，加20mL5％H2SO4溶解，過濾于錐形瓶中，用NH3·H2O調(diào)pH為10，置80℃水浴，加熱5rnin，析出沉淀，置冰箱中過夜，離心，傾去上清液，用1％氨水洗至無色，殘?jiān)?％H2SO4溶解并定容至2mL，置冰浴中滴加濃H2SO45mL，lmin后滴加1％甲醛2．5mL，90min后，用1％H2SO4定容至10mL，用1cm比色皿，空白管調(diào)零，于波長(zhǎng)520nm處測(cè)吸光度(同時(shí)做空白試驗(yàn))。
4．標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
吸取馬鈴薯毒素標(biāo)準(zhǔn)液(1mg·mL-1)0．0mL、0．1mL、0．2mL、0．3mL、0．4mL、0．5mL于10mL比色管中，加1％H2SO4至2mL，置冰浴中滴加濃H2SO45mL，1min后加1％甲醛2．5mL，90min后，用1％H2SO4定容至刻度，用1cm比色皿，零管調(diào)零，于波長(zhǎng)520nm處分別測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
5．計(jì)算
X=(CS*1000)/[m*(V1/V2)*1000]
式中：X——馬鈴薯中馬鈴薯毒素含量，mg·k-1；
Cs——樣液吸光度查標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)應(yīng)含量，μg；
V1——檢測(cè)體積，mL；
V2——樣液定容體積，mL；
m——樣品質(zhì)量，g。
6．說明
①樣品以制成勻漿液為宜。
②在冰浴上滴加濃H2SO4時(shí)，宜控制在3min以上滴完；滴加2．5mL1％甲醛宜在2．5min以上滴完，不應(yīng)過快，否則會(huì)發(fā)生碳化現(xiàn)象，影響比色。
