1．原理
樣品中的游離棉酚經(jīng)丙酮提取后，在乙醇中與苯胺生成黃色化合物，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。
2．儀器
分光光度計(jì)。
3．試劑
①乙醇。
②苯胺。
③其他試劑同紫外分光光度法。
4．檢測步驟
取1g樣品于具塞錐形瓶中，加20mL70％丙酮，振蕩30min，置冰箱中過夜，過濾于試管中，取2mL濾液于10mL比色管中，加3mL苯胺，混勻，于80℃水浴中加熱15min，加乙醇至刻度，混勻，15min后，用lcm比色皿，空白管調(diào)零，于波長445nm處測吸光度(同時(shí)做空白試驗(yàn))。
5．標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
取標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(50μg·mL-1)0．0mL、0．2mL、0．4mL、0．6mL、0．8mL、1．0mL分別于10mL比色管中，各管加70％丙酮至2mL，再各加苯胺3mL，混勻，于80℃水浴中加熱15min，冷卻，加乙醇至刻度，15min后，用1cm比色皿，零管調(diào)零，于波長445nm處比色，分別記錄吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
6．計(jì)算
公式參照紫外分光光度法。
7．說明
苯胺為顯色劑，應(yīng)為無色或淡黃，若色深需重蒸餾。
