1.原理
樣品中棉酚經(jīng)丙酮提取后,在紫外波長378nm處有最大吸收,其吸光度與棉酚含量成正比,經(jīng)與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。
2.儀器
紫外分光光度計(jì)。
3.試劑
①70%丙酮。
②棉酚標(biāo)準(zhǔn)貯存液(1mg·mL-1):稱取棉酚標(biāo)準(zhǔn)品0.1000g于100mL容量瓶中,加70%丙酮溶解并定容至刻度。
③棉酚標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(50μg·mL-1):用70%肉削稀粹足谷。
4.標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
取棉酚標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(50pg·mL-1)0.0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL分別于10mL比色管中,各加70%丙酮至刻度,混勻,10min后用lcm石英比色皿,波長378nm處,零管調(diào)零比色,分別記錄吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
5.檢測步驟
取1g樣品于具塞錐形瓶中,加20mL70%丙酮,振蕩30min,置冰箱中過夜,取上清液,過濾,取濾液于1cm石英比色皿,波長378nm,70%丙酮凋零,樣品測吸光度。
根據(jù)樣品的吸光度,即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得樣品中棉酚含量。
6.計(jì)算
X=(CS*1000)/[m*(V1/V2)*1000]
式中:x——棉子油中游離棉酚含量,mg·kg-1;
CS一—樣液吸光度查標(biāo)準(zhǔn)曲線對應(yīng)含量,μg;
V2——樣液總體積,mL;
V1——樣液檢測體積,mL;
m——樣品質(zhì)量,g。
7.說明
①本法檢測的是油樣中的游離棉酚含量。
②本法用丙酮提取游離棉酚時(shí),常有其他成分干擾而影響分析結(jié)果。