純凈的苯甲酸鈉在225nm處有最大吸收峰,它的吸光度與濃度的關系符合比爾定律。
1.主要儀器
紫外光分光光度計。
2.主要試劑
①酚酞溶液:取1酚酞溶于100mL95%乙醇中。
②85%正磷酸。
③重鉻酸鉀(0.2mol·L-1):溶解4.9g重鉻酸鉀于水中,稀釋至500mL。
④硫酸(2mol·L-1):稀釋66.5mL濃硫酸至500mL。
⑤苯甲酸鈉貯備液(100mg/L):稱量經(jīng)過干燥的苯甲酸鈉100mg(105℃干燥2h),加100mL0.lmol·L-1氫氧化鈉及適量的水溶解,定量轉于1000mL容量瓶中,以水定容至刻度,搖勻。
⑥苯甲酸鈉工作液(20mg/L):稀釋20mL貯備液至100mL。
3.標準曲線的繪制
移取苯甲酸鈉工作液0、l、2、3、4、5mL于6個10mL容量瓶中,各加人lmL0.1mol·L-1氫氧化鈉溶液并用水定容,在225nm處測定吸光度。以吸光度對濃度制成標準曲線。
4.樣液中苯甲酸鈉的測定
①樣液的制備:準確稱量5g左右果汁于100mL容量瓶中,加50mL水,以酚酞為指示劑,以0.1mol·L-1氫氧化鈉溶液調整至呈粉紅色,再以水定容。
②空白液的制備:移取20mL上述中型樣液(應含苯甲酸鈉在200~1000μg,否則增減所取的mL數(shù))于250mL蒸餾瓶中,加20g無水硫酸鈉及30mL水,連接蒸餾設備(以50mL容量瓶、內置5mL0.1mol·L-1氫氧化鈉溶液為吸收瓶)。以大火加熱,調節(jié)火力,使餾液為10mL時所需的時間約為10min。收集餾液35mL后停止蒸餾,以水洗凈冷凝管,然后以水定容此接收瓶。
③比色液的制備:方法與空白液制備相同,只是在加20g無水硫酸鈉以前,要加1mL正磷酸。
④樣液的比色:以空白液為對照,于225nm處測定吸光度,從標準曲線可得苯甲酸鈉的濃度。
5.計算
苯甲燃(g·kg-1)=[X*(V/V/)/m]*1000
式中:m——樣品質量,g;
V——萃取mg樣品所得到的溶液體積,mL;
V/——比色用的溶液體積,mL;
X——V/毫升中含苯甲酸鈉的重量,g(從標準曲線查得)。
6.說明
用乙醚提取時,不要上下振蕩以免生成乳狀液,不易分離,應旋轉分液漏斗進行提取。如形成乳濁液,可用一玻棒攪拌,或對乳狀液進行一、二次上下的激烈振蕩,或用離心機分離;提取液被吹干后,最好放置過夜,以排除可能存在的醋酸的干擾,否則結果偏高。