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油脂中丙二醛檢測——硫代巴比妥酸分光光度法

• 發(fā)布日期：2016/9/21 9:25:32 閱讀次數(shù)：2107

• 對油脂中的丙二醛進(jìn)行檢測，能準(zhǔn)確地反映動(dòng)物油脂酸敗變質(zhì)的程度。油脂中丙二醛檢測主要采用硫代巴比妥酸分光光度法。

  1．原理

  油脂中不飽和脂肪酸經(jīng)氧化分解產(chǎn)生丙二酸乙醛，經(jīng)在酸性條件下隨水蒸氣蒸出，與硫代巴比妥酸試劑作用生成紅色化合物，在波長535nm下比色，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。-

  2．儀器

  分光光度計(jì)。

  3。試劑

  ①HCI(1+2)。

  ②液體石蠟。

  ③0．02mol·L^-1硫代巴比妥酸(TBA)試劑：稱取α^—TBA0．2883g，溶于90％醋酸中，水浴中加熱助溶，并用醋酸定容至100mL，貯于棕色瓶。

  ④丙二醛(TEP)標(biāo)準(zhǔn)貯存液(100μg· mL^-1)：稱取1，1，3，3一四乙氧基丙烷0．313lg，用水溶解并定容至1L，冰箱保存1周。

  ⑤TEP標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(1．0μg·mL^-1)。

  4．標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

  取TEP標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(1．0μg·mL^-1)0．0mL、1．0mL、2．0mL、3．0mL、4．0mL、5．0mL于具塞試管中，用水補(bǔ)足至5mL，分別加TBA試劑5mL，混勻，置沸水浴35min，取出冷卻，于1cm比色皿，波長535nm處測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

  5．檢測

  準(zhǔn)確稱取10g樣品于凱氏燒瓶中，加20mL水、1mL(1+2)HCl，再調(diào)pH為1．5，加液體石蠟2mL，連接蒸餾裝置進(jìn)行蒸餾，收集蒸餾液50mL于錐形瓶中(同時(shí)做空白試驗(yàn))。取蒸餾液5mL于具塞試管中，加TBA試劑5mL，混勻，置沸水浴35min，，取出冷卻，于1cm比色皿，空白管調(diào)零，波長535nm處測吸光度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得樣品被測液中組胺含量。

  6．計(jì)算

  X=(C_S*1000)/(m*V₁*V₂*1000)

  式中：X——油脂中丙二醛含量，mg·kg^-1；

  Cs——樣液吸光度查標(biāo)準(zhǔn)曲線得含量，μg；

  m——樣品質(zhì)量，g；

  V1——測試用體積，mL；

  V2——蒸餾收集液體積，mL。

  7．說明

  肉脂或生脂肪需煉制成油待處理。如油脂凝固，需在水浴(80℃)上融化后備用。

  
  

  注：華南標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)網(wǎng)-國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采購平臺(tái)