河豚毒素檢測方法有快速定性與生物毒素試驗法、河豚毒素毒力檢測法和紫外分光光度法。
一、快速定性與生物毒性試驗法
1．試劑
①10％乙酸鉛液。
②H2S。
③10％H3PO4·12WO3。
④無水乙醇。
⑤濃H2SO4。
⑥K2Cr2O7。
2．檢測步驟
取100 g樣品于組織搗碎器中，搗碎成勻漿，加100 mL水，混勻，10 min后過濾于錐形瓶中，加10 mL10％乙酸鉛液，混勻，過濾于另一錐形瓶中，通人H2S，過濾于另一分液漏斗中，加10％H3PO4。12WO35 mL，混勻，過濾。濾液于另一錐形瓶中，置水浴蒸發(fā)至近干，移人真空干燥器干燥，殘渣用無水乙醇浸制3次，不溶解帶黃色殘渣為河豚毒素。錐形瓶中的殘渣分別用于定性和毒性試驗。
①定性：取少許殘渣于試管中，加濃H2SO4溶解，加K2Cr2O7少許，呈鮮艷綠色為陽性。
②毒性試驗：取少許殘渣于試管中，加8 mL水溶解，煮沸2 min，滅菌，冷卻，各取1 mL， 分別注入6只青蛙腹中(每只重約35 g，雌雄各半)，6 min后青蛙相繼出現(xiàn)四肢麻痹，8 min后呼吸困難死亡，解剖未見異常(空白對照組24 h未見異常)。
3．說明
①樣品采集以當餐剩余的河豚魚為宜。
②樣液在加入乙酸鉛后，通人H2S以除去多余的Pb，形成PbS沉淀；加H3PO4·12WO3以除去膽堿等物質(zhì)的干擾。
注：華南標準物質(zhì)網(wǎng)-國家標準物質(zhì)采購平臺
