維生素E又名生育酚,屬于脂溶性維生素,是一組具有α一生育酚活性的化合物。食物中存在著α、β、γ、δ四種不同化學結構的生育酚和四種生育三烯酚,各種食物中它們的含量有很大差別,生理活性也不相同,其中以a一生育酚的活性最強,含量最多(約90%)。
維生素E廣泛分布于動、植物食品中,含量較多的為麥胚油、棉子油、玉米油、花生油、芝麻油、大豆油等植物油料,此外肉、魚、禽、蛋、乳、豆類、水果以及綠色蔬菜中也都含有維生素E。膳食中維生素E的活性以α一生育酚當量(α-TEs,mg)來表示,規(guī)定1mga-TE相當于1mg d-a一生育酚的活性。1個國際單位(IU)維生素E的定義是1mgd-α一生育酚乙酸酯的活性,1mgd-α一生育酚=1.49IU維生素E。
維生素E的測定方法有:比色法、熒光法、氣相色譜法、液相色譜法等。比色法操作簡單,靈敏度較高,但對維生素E沒有特異的反應,需要采取一些方法消除干擾。熒光法特異性強、干擾少、靈敏、快速、簡便。高效液相色譜法具有簡便、分辨率高等優(yōu)點,可在短時間完成同系物的分離定量,是目前測定維生素E最好的分析方法。這里主要介紹熒光法。
樣品經(jīng)皂化、提取、濃縮蒸干后,用正己烷溶解不皂化物,在295nm激發(fā)波長,324nm發(fā)射波長下測定其熒光強度,并與標準α一維生素E作比較,即可計算出樣品中維生素E的含量。
樣品中維生素E含量根據(jù)下列公式計算:
X=[(U×c×V)/S×m]×(100/1000)
式中:X—樣品中α一維生素E的含量,mg/100g;
U—樣品溶液的熒光強度;
c—標準使用液的濃度,μg/mL;
V—樣品稀釋體積,mL;
S—標準使用液的熒光強度;
m—樣品的質(zhì)量,g。
說明及注意事項如下。
(1)對于α一維生素E含量高的樣品,此方法靈敏度較比色法高得多;對于植物性樣品,一般α一維生素E含量不多,而其他異構體含量較多。每一種同系物的激發(fā)波長和發(fā)射波長的熒光強度不盡相同,因此測定值多數(shù)不能代表真實值,測定誤差較大。特別是當含有大量S一維生素E時,測定值比真實值高得多,因為S體的熒光強度比a體強70%.
(2)熒光法測定的樣品為花生油,如測其他食品,需先抽提脂肪。經(jīng)抽提脂肪后的樣品其發(fā)射波長改為330nm。