KMnO4-鈣指示劑-羅丹明B化學(xué)發(fā)光法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚的含量
孫四娟1,唐驍爽2,唐玉海1,熊鳳梅1,木尼熱·阿布都克熱木3,王麗娟1
(1.西安交通大學(xué)理學(xué)院分析科學(xué)研究所,陜西西安 710061;2.蘭州大學(xué)第一醫(yī)院,甘肅蘭州 730000; 3.新疆喀什師范學(xué)院生命與環(huán)境科學(xué)系,新疆喀什 844007)
摘要:目的 建立快速、準(zhǔn)確測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚的流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光新方法。方法 酸性條件下,KMnO4可氧化鈣指示 劑產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,羅丹明B對(duì)此發(fā)光有較強(qiáng)的增敏,對(duì)乙酰氨基酚的存在抑制體系發(fā)光,基于此結(jié)合流動(dòng)注射技術(shù)建立 了一種新的測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚含量的化學(xué)發(fā)光法。結(jié)果 在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,在5.0×10-7-1.0×10-5g/mL范圍 內(nèi),對(duì)乙酰氨基酚的質(zhì)量濃度與化學(xué)發(fā)光信號(hào)的降低值有較好的線性關(guān)系,檢出限(S/N=3)為7.0×10-8g/mL,對(duì)1.0 ×10-6g/mL對(duì)乙酰氨基酚進(jìn)行11次平行測(cè)定,其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.2%。結(jié)論 本方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確,用于片劑中 對(duì)乙酰氨基酚含量的測(cè)定,得到較滿意的結(jié)果。
關(guān)鍵詞:化學(xué)發(fā)光;KMnO4;鈣指示劑;羅丹明B;對(duì)乙酰氨基酚
中圖分類號(hào):R927.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1671-8259(2008)04-0475-04
對(duì)乙酰氨基酚(paracetamol)是具有解熱、鎮(zhèn)痛作用 的酰胺類藥物,常與其他解熱、鎮(zhèn)痛藥物組成復(fù)方制劑。 因此,建立一種快速、簡(jiǎn)單、靈敏的方法對(duì)對(duì)乙酰氨基酚 進(jìn)行分析具有重要意義。文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)乙酰氨基酚含量 測(cè)定的方法較多,包括高效液相色譜法(HPLC)[1-4]、紫 外分光光度法[5]、電化學(xué)法[6-9]、毛細(xì)管電泳法[10-12]、熒光 法[13]、化學(xué)發(fā)光法[14]和其他光譜法[15]等。所采用的各 種方法都各有其優(yōu)缺點(diǎn)。文獻(xiàn)報(bào)道用KMnO4-Ru (bpy)2+3化學(xué)發(fā)光法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚的含量,方法的 檢出限為2.0×10-7g/mL,且使用了較昂貴的Ru (bpy)2+3試劑[14]?；谖覀儗?duì)KMnO4化學(xué)發(fā)光體系的 研究[16],本研究發(fā)現(xiàn)對(duì)乙酰氨基酚的存在可以抑制 KMnO4-鈣指示劑-羅丹明B體系化學(xué)發(fā)光,據(jù)此建立了 新的測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚含量的化學(xué)發(fā)光法。
1 材料與方法
1.1 材料 IFFM-E型流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀
(西安瑞邁電子科技有限公司),IFFS-A型多功能化 學(xué)發(fā)光檢測(cè)器(西安瑞邁電子科技有限公司)。光電 倍增管(PMT)高壓為600 V,使用的連接管均為聚四 氟乙烯管(PTFE,0.8 mm i.d.)。
KMnO4溶液:精密稱取KMnO4(西安化學(xué)試劑 廠)0.395 0 g,用適量水溶解并定容于25 mL容量瓶中 得1.0×10-1mol/L KMnO4儲(chǔ)備液;鈣指示劑溶液:精 密稱取鈣指示劑(2-萘酚-4-磷酸-偶氮-2羥基-3-萘酸,上 海公私合營(yíng)新中化學(xué)廠)2.191 0 g,用適量水溶解并定容 于200 mL容量瓶中,得2.5×10-2mol/L鈣指示劑儲(chǔ)備 液;羅丹明B溶液:精密稱取羅丹明B(天津天泰精細(xì)化 學(xué)品有限公司),用適量水溶解并定容于100 mL的容量 瓶中即得到1.0×10-2mol/L羅丹明B儲(chǔ)備液。
對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品溶液:準(zhǔn)確稱取對(duì)乙酰氨基 酚對(duì)照品(中國(guó)藥品及生物制品檢驗(yàn)所;批號(hào): 100018-200408;純度:99.6%)0.100 0 g,用適量水溶 解并分別將其定容于100 mL的容量瓶中可得1.0× 10-3g/mL的對(duì)乙酰氨基酚的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,使用前逐 級(jí)稀釋至所需濃度。 對(duì)乙酰氨基酚片劑(石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司), 實(shí)驗(yàn)中所用的試劑均為分析純,水為二次蒸餾水。
1.2 方法 流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光的流路圖如圖1所示。 流路a、b、c、d分別用來(lái)輸送酸性羅丹明B、樣品溶 液、KMnO4及鈣指示劑溶液。其中樣品溶液通過(guò)Y 型混合器與KMnO4混合,此混合溶液通過(guò)六通閥與 鈣指示劑混合后,再通過(guò)一Y型混合器與羅丹明B 混合發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng),所產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光信號(hào)由光 電倍增管放大檢測(cè)并由計(jì)算機(jī)記錄。主泵與副泵的 流速都為1.2 mL/min。
“
2 結(jié) 果
2.1 不同氧化劑的選擇
實(shí)驗(yàn)考察了KMnO4、 KIO4、K2Cr2O7、KBrO3、Ce(Ⅳ)、和H2O2等不同氧 化劑的作用,研究發(fā)現(xiàn)只有選用KMnO4時(shí)得到的發(fā) 光信號(hào)最穩(wěn)定,且峰形好。
2.2 KMnO4濃度的影響
考察了1.0×10-2-1.0 ×10-5mol/L不同濃度KMnO4對(duì)檢測(cè)信號(hào)的影響。 結(jié)果表明,隨著KMnO4濃度的增大發(fā)光信號(hào)也增 大,但當(dāng)其濃度大于5.0×10-3mol/L時(shí),化學(xué)發(fā)光 信號(hào)值不穩(wěn)定,峰形較差。本實(shí)驗(yàn)選擇5.0×10-3 mol/L KMnO4為最佳實(shí)驗(yàn)條件。
2.3 酸性介質(zhì)的影響
考察了相同濃度的H2SO4、 HNO3、H3PO4、和HCl等酸性介質(zhì)對(duì)化學(xué)發(fā)光信號(hào) 的影響。觀察到在其他幾種介質(zhì)中都可以產(chǎn)生發(fā)光, 雖使用HNO3可以得到較大的發(fā)光信號(hào),但信號(hào)不穩(wěn) 定。只有選用介質(zhì)H2SO4時(shí)所得到的化學(xué)發(fā)光信號(hào) 較大而且穩(wěn)定,所以實(shí)驗(yàn)選取H2SO4作為酸性介質(zhì)。 同時(shí)考察了0.005-2 mol/L不同濃度的H2SO4 對(duì)化學(xué)發(fā)光信號(hào)的影響,結(jié)果表明當(dāng)H2SO4濃度從 0.005-1 mol/L變化時(shí)化學(xué)發(fā)光信號(hào)不斷增大, H2SO4大于1 mol/L時(shí),H2SO4濃度對(duì)化學(xué)發(fā)光信 號(hào)的影響較小。本實(shí)驗(yàn)選擇1 mol/L的H2SO4作為 反應(yīng)的最佳條件。
2.4 熒光物的選擇及羅丹明B濃度的影響
研究 了不同熒光增敏劑羅丹明B、羅丹明6、羅丹明123、 熒光素等對(duì)實(shí)驗(yàn)體系發(fā)光信號(hào)的影響,結(jié)果表明只有 在選用羅丹明B時(shí)得到的化學(xué)發(fā)光信號(hào)最大且較穩(wěn) 定,所以實(shí)驗(yàn)以羅丹明B作熒光增敏劑。 考察了1×10-3-1×10-5mol/L不同濃度羅丹 明B對(duì)檢測(cè)信號(hào)的影響。結(jié)果表明,隨著羅丹明B 濃度增大,發(fā)光信號(hào)增大,當(dāng)其濃度為2.5×10-4 mol/L時(shí),得到最大的化學(xué)發(fā)光信號(hào)值,之后,增大羅 丹明B的濃度對(duì)化學(xué)發(fā)光信號(hào)的影響不顯著。本實(shí) 驗(yàn)選擇1.0×10-4mol/L羅丹明B為最佳實(shí)驗(yàn)條件。
2.5 鈣指示劑濃度的影響
研究了2.5×10-5- 2.5×10-3mol/L范圍內(nèi)不同濃度鈣指示劑對(duì)化學(xué)發(fā) 光信號(hào)的影響。實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)鈣指示劑濃度逐漸增大 時(shí),發(fā)光信號(hào)也不斷增大,當(dāng)鈣指示劑濃度達(dá)到1.0 ×10-4mol/L時(shí),發(fā)光信號(hào)達(dá)到最大值,濃度大于 1.0×10-4mol/L時(shí),化學(xué)發(fā)光信號(hào)又減小,因而選取 1.0×10-4mol/L作為優(yōu)化的條件進(jìn)行以下的實(shí)驗(yàn)。
2.6 線性范圍及檢出限
在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,對(duì) 對(duì)乙酰氨基酚標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行逐級(jí)稀釋分析,結(jié)果表明 對(duì)乙酰氨基酚在5.0×10-7-1.0×10-5g/mL范圍內(nèi) 有良好的線性關(guān)系,方法的檢出限為7.0×10-8g/mL, 對(duì)1.0×10-6g/mL對(duì)乙酰氨基酚進(jìn)行11次平行測(cè) 定,得到的RSD (相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差)為2.2%。線性關(guān)系 的相關(guān)參數(shù)如表1所示。
2.7 干擾實(shí)驗(yàn)
對(duì)1.0×10-6g/mL對(duì)乙酰氨基酚 進(jìn)行測(cè)定,當(dāng)測(cè)定的相對(duì)誤差為±5%時(shí)可認(rèn)為共存 物質(zhì)不引起測(cè)定的干擾。結(jié)果表明,共存物質(zhì)的允許 量為:1 000倍的K+、Na+、NO-3、Cl-、Br-,500倍的 檸檬酸鈉、淀粉、硬脂酸鹽、乳糖,50倍的尿素、SO2-4、 PO3-4、CO2-3、Ca2+、Mg2+、Ba2+、Fe3+,10倍的Al3+、 Fe2+、Zn2+對(duì)測(cè)定不引起干擾。
2.8 樣品分析
取對(duì)乙酰氨基酚(標(biāo)示量為0.5 g/片) 10片,精密稱定、研細(xì)、混勻。準(zhǔn)確稱取相當(dāng)于1.0 g對(duì) 乙酰氨基酚精細(xì)粉末,用適量水溶解并定容于100 mL 的容量瓶中,得到1.0×10-3g/mL的樣品溶液,稀釋至 工作曲線線性范圍內(nèi)按圖1所示流路進(jìn)行分析。并進(jìn) 行加樣回收實(shí)驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表2、表3;同時(shí)將本法與藥 典方法進(jìn)行了對(duì)照。結(jié)果表明,本方法用于對(duì)乙酰氨 基酚片劑含量的測(cè)定與藥典方法無(wú)顯著差異,但相對(duì) 于藥典方法,本法快速、操作簡(jiǎn)單,儀器運(yùn)行成本低。
3 討 論
在酸性條件下,KMnO4可以單獨(dú)氧化羅丹明B 或鈣指示劑產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,但產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光信號(hào)都 較小,當(dāng)兩者都存在時(shí)產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光信號(hào)較大且重 現(xiàn)性好,可能是由于KMnO4對(duì)羅丹明B及鈣指示劑 的協(xié)同氧化作用。未報(bào)道KMnO4在酸性條件下發(fā) 光體的存在,因此其發(fā)光體可能為羅丹明B及鈣指 示劑的中間體,其可能的發(fā)光機(jī)制如下:
高錳酸鉀+羅丹明B+鈣指示劑羅丹明B*+ 鈣指示劑*+其他物質(zhì) 鈣指示劑*鈣指示劑+hv 羅丹明B*羅丹明B+hv 對(duì)乙酰氨基酚+鈣指示劑*+羅丹明B* 鈣指示劑+羅丹明B+其他物質(zhì)
應(yīng)用此方法測(cè)定片劑中對(duì)乙酰氨基酚含量,簡(jiǎn) 便、快速、準(zhǔn)確,結(jié)果滿意。
來(lái)源：中國(guó)化學(xué)試劑網(wǎng)
