1.儀器
①熒光光度計(jì)。
②免疫親和柱(美國VICAM公司)。
2.試劑
①甲醇。
②0.002％NaCl。
③0.0l％溴液。
④熒光光度計(jì)校準(zhǔn)液：稱取二水硫酸奎寧3.40 g，用0.05mol·L H2S04定容至100 mI。
3.檢測(cè)步驟
①樣品前處理：準(zhǔn)確稱取樣品(25 g)于具塞錐形瓶中，加。NaCl 5 g、甲醇+水(7+3)125 mI。，均勻2 min，過濾于錐形瓶中，取濾液20 mL于錐形瓶中，加水20 mL，混勻，用玻纖濾紙過濾2次。免疫親和柱連于10 cm玻璃針筒下，加濾液10 mL注人玻璃針筒中，以6 mL／min流速過柱，流盡后，用10 mI?！?水淋洗柱，棄流出液，加甲醇10 mI。洗脫，流速2 mL／min，收集于比色管中待檢(同時(shí)做空白試驗(yàn))。
②熒光光度計(jì)比色：將待檢液比色管中加0.01％溴液1 mL，混勻，靜置卜min，用熒光光度計(jì)比色測(cè)定，自動(dòng)報(bào)數(shù)。
4.說明
①免疫親和技術(shù)是利用免疫化學(xué)原理，用大劑量單克隆抗體，選擇性吸附提取液中的抗原物質(zhì)AFT。
②本法采用免疫親和柱，解決了樣品凈化問題。
③本法采用二水硫酸奎寧作為校準(zhǔn)液，避免了工作人員對(duì)AFT標(biāo)準(zhǔn)品的接觸，對(duì)工作人員安全健康有了可靠保證。
