1.檢測步驟
整個操作需在暗室中進(jìn)行。
樣品提取 提取液可由下式計算：
提取液量(mL) = 8／15(90+A+B)
式中：A——樣品中水分量，mL(水分量參考中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生研究所編《食物成分表》)；
B——加水量，mL。
因各提取液中含48 mL甲醇，需39 mL水才能調(diào)到甲醇與水之體積比為55：45，因此，加入4％NaCl液量等于87(mL)減去提取液量(mL)。
a.牛乳與淡煉乳：準(zhǔn)確稱取30 g混勻樣于錐形瓶中，加90 mL甲醇，振蕩30 min，用快速濾紙濾于100 mL具塞量筒中，按62 mL牛乳與52 mL淡煉乳提取液(各相當(dāng)于16 g樣品)。
b.牛奶粉：準(zhǔn)確稱取15 g樣于錐形瓶中，加20 mL水，再加90 mL甲醇，振蕩30 min，過濾，按59 mL提取液(相當(dāng)于8 g樣品)。
c.乳酪：取15 g切細(xì)，過10目圓孔篩于錐形瓶中，加水5 mI。，甲醇90 mL，振蕩30 min，過濾，按56 mL提取液(相當(dāng)于8 g樣品)。
d.黃油：取10 g于錐形瓶中，加40 mL石油醚溶解，加水45 mL、甲醇55 mL，振蕩30min，移于分液漏斗中，加Na2Cl 1.5 g搖溶，待分層，按80 mL提取液(相當(dāng)于8 g樣品)。
e.豬組織：取30 g樣于乳缽中，加玻璃砂磨細(xì)，移置錐形瓶中，加甲醇90 mL，振蕩30min，濾后按59 mL豬肝、64 mL豬腎、58 mL豬瘦肉提取液(各相當(dāng)于16 g樣品)。
②樣品凈化
a.用石油醚分配凈化：將收集的提取液于分液漏斗中，再加4％NaCl溶液。加40 mL石油醚，振蕩2 min，分層后將下層甲醇一NaCl水層移于原量筒中，棄去石油醚，再將量筒中溶液移于原分液漏斗中。再重復(fù)用石油醚提取2次，每次30 mL，最后將量筒中溶液轉(zhuǎn)移人分液漏斗中。黃油樣用石油醚提取2次，每次40 mI。
b.用氯仿分配提?。杭?0 mL氯仿于上述分液漏斗中，振搖2 min，分層后將下層氯仿移于原量筒中，再重復(fù)用氯仿提取2次，每次10 mI，并于原量筒中。棄去上層甲醇水溶液。
c.用水洗氯仿層與濃縮：將氯仿層倒回原分液漏斗中，加4%NaCl溶液30 mL，振搖30s，靜置。待上層有部分澄清時，即可將下層氯仿收集于原量筒中。加10 g無水Nrd2S04，振搖，放置澄清后，將此液經(jīng)無水NazS04過濾于蒸發(fā)皿中。NaCl水層再用10 mI。氯仿提取1，一并過濾于蒸發(fā)皿中。最后用少量氯仿洗量筒與無水Na。S04，也一并濾于蒸發(fā)皿中。于65℃用減壓吹氣法將此液濃縮至0.5 mL。
