l.原理
同紙層析法，只是將紙層析換成中性氧化鋁柱層析。
2．儀器
色譜柱：1．Ocm×25cm的玻璃柱，底端收縮變細，并有一活塞，用于調空液體流速；距底端上1cm處有一篩板，孔徑為16～30?m。用前需干燥。
其余儀器同紙層析法。
3．試劑
①中性氧化鋁：80~100目。用前于180℃烘干4 h至恒重。
②其余試劑同紙層析法。
4．操作步驟
①樣品提取、洗滌等步驟同紙層析法。
②將洗滌后提取液濃縮并定容至10mL。
③柱色譜：將已干燥的中性氧化鋁浸泡在石油醚中，以濕法填充色譜柱至高度為15cm，其上端加2cm高的無水Na2SO4，使石油醚自由流下，保證其水平高于Na2S04平面0．5cm(注意：色譜柱填充時應避免水分，不要有氣泡進入)。將樣品提取液加入色譜柱上，自由流下，待提取液體流至柱面時，分次加入石油醚2mL，洗滌柱壁，再加人石油醚洗脫，收集流出液至黃色帶全部流出。流出液經(jīng)60℃水浴減壓蒸餾后，N2吹干，定容。
④比色測定同紙層析法。
5．說明
①柱色譜法的優(yōu)點是在測定胡蘿卜素的同時可測定其他類胡蘿卜素和色素。類胡蘿卜素、色素和胡蘿卜素的極性不同，胡蘿卜極性最小先被極性小的石油醚洗脫，增加洗脫液極性(如加入乙醚、丙酮)，可先后將極性稍大的類胡蘿卜素(如葉黃素、葉紅素)、葉綠素洗脫。
②紙層析法和柱色譜法都不能區(qū)分α-，β-和γ-胡蘿卜素，雖然標準品是β-胡蘿卜素，但實際結果為總胡蘿卜素。不過天然食品中大部分為β-胡蘿卜素，對結果影響不大。兩種方法結果相當。
