一、概述
1.測量依據(jù)
JJG861-2007《酶標(biāo)分析儀》檢定規(guī)程。
2.測量對象
新制造、使用中及修理后的各類酶標(biāo)分析儀。
3.測量標(biāo)準
光譜中性玻璃濾光片，不確定度U=0.005A，k=3。
4.測量方法
在規(guī)定的環(huán)境條件下，儀器預(yù)熱和調(diào)好零位后，在405nm波長處對標(biāo)稱值為1.015A的光譜中性玻璃濾光片進行吸光度示值誤差的檢定，連續(xù)測量3次，取其平均值與吸光度標(biāo)稱值之差作為吸光度示值誤差的數(shù)值。
二、數(shù)學(xué)模型
1.數(shù)學(xué)模型
式中:ΔA——吸光度示值誤差；Ai——第i次測量的吸光度值；As——吸光度標(biāo)稱值。
2.靈敏系數(shù)
三、測量不確定度的主要來源
1.測量重復(fù)性引入的標(biāo)準不確定度分量。
2.操作方法差異引入的標(biāo)準不確定度分量。
3.光譜中性玻璃濾光片引入的標(biāo)準不確定度分量。
四、各輸入量的標(biāo)準不確定度分量評定
1.輸入量
的標(biāo)準不確定度的評定
(1)測量重復(fù)性引入的標(biāo)準不確定度分量
選取4臺同型號的酶標(biāo)分析儀作為被測對象，在405nm波長處用標(biāo)稱值為1.015A的光譜中性玻璃濾光片對其各進行10次獨立測量，分別得到4組測量數(shù)據(jù)，并設(shè)計為如表1所示的Excel電子表格。
<CTSM>表1合并樣本標(biāo)準偏差Sp計算電子表格</CTSM>
Excel電子表格的插入和設(shè)計步驟如下:首先，在Word文檔中插入一個Excel電子表格，將光標(biāo)移到要插入的位置，執(zhí)行“插入”菜單中的“對象”命令，在“新建對象類型”選項中單擊“Microsoft Excel工作表”，而后單擊“確定”按鈕；其次，在B1～K1單元格中輸入測量次數(shù)1～10，在L1單元格中輸入實驗標(biāo)準差的符號si，在A2～A5單元格中輸入數(shù)據(jù)組數(shù)1～4，在B2～K5單元格區(qū)域中輸入所測得的4組數(shù)據(jù)；最后，在L2單元格中輸入計算第1組數(shù)據(jù)實驗標(biāo)準差的公式:單擊L2單元格，輸入“=STDEV(B2∶K2)”，回車，從L2單元格拖動填充柄至L5，即可獲得4組數(shù)據(jù)的實驗標(biāo)準差。單擊M2單元格，輸入“=L2^2”，回車，從M2單元格拖動填充柄至M5，即可獲得4個實驗標(biāo)準差的平方。在B6單元格中輸入“=SQRT(SUM(M2∶M5)/4)”，回車。這樣，一個計算實驗標(biāo)準差和合并樣本標(biāo)準差的Excel電子表格就設(shè)計好了。采用以上步驟制作好的表格如表1所示。
根據(jù)Excel計算得到Sp=0.003A，實際測量取3次測量的算術(shù)平均值作測量結(jié)果，因此，酶標(biāo)分析儀測量重復(fù)性引入的標(biāo)準不確定度分量為
(2)操作方法差異引入的不確定度分量
由于酶標(biāo)儀采用垂直光路測定法，所以酶標(biāo)儀專用測試板放置的平整度等操作方法的差異對測量結(jié)果會產(chǎn)生影響，根據(jù)經(jīng)驗估計操作方法差異引入的不確定度為0.005A，按正態(tài)分布考慮，當(dāng)置信概率p=99.73%、包含因子k=3時，標(biāo)準不確定度
。
2.輸入量As的標(biāo)準不確定度的評定
輸入量As的標(biāo)準不確定度主要來源于測量標(biāo)準的定值不確定度，根據(jù)標(biāo)準證書，光譜中性玻璃濾光片給出的測量結(jié)果的擴展不確定度為0.005A，包含因子k=3，則輸入量As的標(biāo)準不確定度u(As)=0.005/3。
五、合成標(biāo)準不確定度及擴展不確定度的評定
用Excel電子表格作各標(biāo)準不確定度匯總表(見表2)，同時完成合成標(biāo)準不確定度及其有效自由度和擴展不確定度的計算。設(shè)計簡介如下:①在A1～J1單元格中分別輸入各列的名稱。②在B2～B8單元格中分別輸入各不確定度來源。③在C2～C7和D2～D7單元格中分別輸入各分散區(qū)間的半寬及其包含因子，在E2單元格中輸入“=C2/D2”，從E2單元格拖動填充柄至E7，在F2～F8單元格中分別輸入各分量的靈敏系數(shù)，在G2單元格中輸入“=E2*F2”，從G2單元格拖動填充柄至G8。在A9單元格中輸入“uc=”，設(shè)置為右對齊，在B9單元格中輸入“=SQRT(SUM(I2∶I8))”，即可獲得合成標(biāo)準不確定度uc。采用以上步驟制作好的表格如表2所示。
<CTSM>表2不確定度分量匯總及相對擴展不確定度計算電子表格</CTSM>
根據(jù)Excel計算得到uc(ΔA)=0.0029A。
取k=2，則擴展不確定度
U=2×uc(ΔA)=2×0.0029A=0.0058A≈0.006A
六、測量結(jié)果的報告
通過上述分析可知，當(dāng)采用酶標(biāo)分析儀專用測試板和光譜中性玻璃濾光片等對酶標(biāo)分析儀進行檢定時，其吸光度示值誤差測量結(jié)果的不確定度為
U=0.006A，k=2
七、結(jié)束語
在進行測量不確定度分析時，任何一個測量結(jié)果的變化都會影響不確定度的評定，因此往往需要大量的計算，本文利用Excel電子表格分析了酶標(biāo)分析儀吸光度示值誤差測量結(jié)果不確定度的來源，對各項不確定度進行了計算和評定，給出了酶標(biāo)分析儀吸光度示值誤差測量結(jié)果的不確定度。實踐證明，利用Excel電子表格進行不確定度分析不僅可以提高計算結(jié)果的正確性，更能夠極大地提高工作效率。
