甜蜜素是甜味劑，允許在飲料、冰淇淋、糕點、蜜餞中使用。檢測一般用氣相色譜法、比色法等。M(C6H12NNNaO3S)=2022。
酸性介質(zhì)中，環(huán)己基氨基磺酸鈉與亞硝酸反應，生成環(huán)己醇亞硝酸脂，利用氣相色譜法定量。
1．儀器
氣相色譜儀(GC儀)，附氫火焰離子化檢測器。
2．儀器工作條件
①不銹鋼色譜柱(M型)：2m×3mm，內(nèi)填l0％SE-30的ChromosorbWAWDMCS(80～100目)。
②柱溫80℃，汽化室，檢測器溫度150℃。
③流速，N240mL／min，H230mL／min，空氣300mL／min。
3．試劑
①正己烷。
②氯化鈉。
③層析用硅膠。
④50g·L1亞硝酸鈉溶液。
⑤10％硫酸溶液。
⑥甜蜜素標準貯存液(10mg·mL-1)：稱取環(huán)己基氨基磺酸鈉標準品1．0000g，用水溶解，并定溶至100mL。
4．標準曲線制備
吸取甜蜜素標準貯存液(10mg·mL-1)于100mL容量瓶中，加水20mL，置冰浴中加50g·L-1的亞硝酸鈉溶液5mL，10％的硫酸溶液5mL，混勻，冰浴中放置30min，不斷搖動，加l0mL正己烷、5g氯化鈉，振搖80次，靜置，分層。吸取正己烷層10mL于具塞離心管中，離心分離，分別取提取液1～5μL，分別注人GC中，繪制標準曲線。
5．測定
樣品經(jīng)處理后，準確稱取已剪碎的固體樣品2g于研缽中，加少量硅膠研磨呈干粉狀，用水溶解，定量轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用水洗研缽，并人容量瓶，定溶至刻度，搖勻，1h后過濾。準確吸取溶液20mL于100mL具塞比色管中，置冰浴中加5g／L的亞硝酸鈉5mL，l0％的硫酸5mL，混勻，冰浴中30min，不斷搖動，加正己烷l0mL，氯化鈉5g，振搖80次，靜置分層。取正己烷層液10mL于具塞離心管中，離心分離，上層清液待測。取提取液l～5μL分別注入Gc儀，測得響應值，從標準曲線上查出相應含量。若為液體樣品，則搖勻后直接準確稱取20g(含二氧化碳的樣品應加熱除去，含酒精的樣品用40g·L-1的氫氧化鈉調(diào)至堿性，于沸水中加熱除去后再稱取)于100mL具塞比色管中，置冰浴中加5g·L-1的亞硝酸鈉5mL，10％的硫酸5mL，混勻，冰浴中30min，不斷搖動，加正己烷10mL，氯化鈉5g，振搖80次，靜置分層。取正己烷層液10mL于具塞離心管中，離心分離，上層清液待測。取提取液1～5μL分別注入GC儀。測得響應值，從標準曲線上查出相應含量。
注：可用超聲提取法。操作如下：準確稱取剪碎并混合均勻的樣品2g，置于150mL錐形瓶中，加入80mL水，浸漬提取2h，于超聲波清洗器中超聲振蕩30min，過濾于100n也容量瓶中，殘渣用20mL水分數(shù)次洗滌，洗液合并濾于容量瓶中，加水至刻度，即得試樣溶液。準確吸取試樣溶液20．00mL于1．0mL比色管中，置于冰浴中，加入5mL50g·L-1亞硝酸鈉溶液，5mL10％的硫酸溶液，搖勻，在冰浴中放置30min。不斷加正己烷10mL，氯化鈉5g，振搖80次，靜置分層。取正己烷層液10n止于具塞離心管中，離心分離，E層清液待測。
6．計算
食品中甜蜜素的含量(g．kg-1)=(m1*1000)/m*(V2/V1)*1000
式中：m1一一從標準曲線上查得的甜蜜素含量，mg；
m——稱取樣品的總質(zhì)量，g；
V2——進樣體積，mL；
V1——樣品液的總體積，mL。
7．說明
該方法多用于飲料、蜜餞、涼果等樣品中甜蜜素的檢測。
