純凈的山梨酸鈉在254nm處有最大吸收峰。樣品經(jīng)三氯甲烷提取后，再以碳酸氫鈉提取，使山梨酸形成山梨酸鈉溶于水溶液中，測其吸光度即得。
1．主要儀器
紫外分光光度計(jì)。
2．主要試劑
①三氯甲烷：以三氯甲烷體積之半的碳酸氫鈉(o．5m01．L-1)提取兩次，而后以無水硫酸鈉干燥，過濾備用。
②0．5mol·L-1碳酸氫鈉：取21g碳酸氫鈉溶于500mL水中。
③0．3mol·L-1碳酸氫鈉。
3．操作步驟
①標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：用0．3mol·L-1碳酸氫鈉溶液和山梨酸配成0、1、2、3、4、5g·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液，于254nm波長下分別測其吸光度。以濃度為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)繪圖，即可得山梨酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
②樣品溶液的制備：稱取50．00g樣品加350mL水于組織搗碎機(jī)中，粉碎5min，使成勻漿，用水稀釋至500mL，搖勻。準(zhǔn)確稱取10g此勻漿，定量轉(zhuǎn)移于50mL容量瓶中，以水定容，混勻。準(zhǔn)確移取10mL此溶液于250mL分液漏斗中，用1.0mL氯仿提取1min。將氯仿層轉(zhuǎn)至125mL錐形瓶中，內(nèi)置5g無水硫酸鈉，振蕩后靜置。
③樣品中山梨酸的測定：移取上述的氯仿溶液50mL于125mL分液漏斗中，用25mL0．3mol·L-1碳酸氫鈉提取lmin。靜置分層后，小心放去氯仿層。取碳酸氫鈉溶液層，于254nm處測其吸光度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線找出其山梨酸的含量，即可算出樣品中山梨酸的含量。
4．計(jì)算
山梨酸含量(μg·g-1)=（從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得三梨酸鉀的含量×稀釋倍數(shù)）/樣品重（g）
