血清鉀、鈉、氯測定是臨床常見的組合檢測項目之一,有助于水、電解質(zhì)平衡和酸堿平衡紊亂的判斷。血清、血漿或全血都可以用于電解質(zhì)測定,但血清與血漿之間,動脈血與靜脈血之間的參考區(qū)間有一定差異。
(一)血清鈉
【檢測方法】血清鈉測定可通過原子吸收分光光度法(atomic absortnion spectroohotometrv,AAS)、火焰發(fā)射分光光度法(flame emission spectrophotometry,F(xiàn)ES)、離子選擇電極法(ionselective electr'ode,ISE)或紫外可見光分光光度法進行。臨床實驗室常采用的是。ISE和FES。
【參考區(qū)間】135.0~145.0mmol/L。
【臨床意義】見第一節(jié)鈉平衡紊亂。
【評價】1.血清鈉鉀測定的標本血清、血漿和其他體液均可作為鈉、鉀測定的標本。血漿鉀比血清低0.2~0.5mmol/L,,因為血液凝固時血小板破裂會釋放出一部分心。脂血標本采用離子選擇電極方法測定,將造成假性低鈉血癥,可高速離心分離后測定。
測定血鉀標本在采血和處理過程中應避免溶血,溶血后紅細胞內(nèi)K+釋放造成測定結果假性增高。血清或血漿標本應及時分離,因全血標本放置時間過長,體外紅細胞能量代謝受到抑制,能量不足導致紅細胞膜上Na+一K+一ATP酶不能正常運轉,從而不能將紅細胞內(nèi)逸出的鉀轉運到胞內(nèi),造成血清鉀升高,使測定結果出現(xiàn)假性增高。
測定血鈉時,血清、血漿標本可以在2~4℃或冰凍存放,紅細胞中鈉的含量僅為血漿中的1/10,即使溶血對鈉濃度測定影響也不會太大。
2.血清鈉鉀常用測定方法及其方法評價
1)離子選擇電極法:ISE法是目前臨床檢測中最常用的方法,其原理是利用電極電位和離子活度的關系來測定離子活度的一種電化學技術,其核心是采用對被測離子選擇性響應的敏感膜。鈉電極離子交換膜的主要成分是硅酸鋰,對Na+選擇性比心高數(shù)干倍。鉀電極采用含有纈氨霉素的中性載體膜,對K+具有很高的選擇性。
離子選擇電極只對水相中活化離子產(chǎn)生選擇性響應,與標本中脂肪、蛋白質(zhì)所占體積無關。血漿中固體物質(zhì)部分(血脂和蛋白質(zhì))約占總體血漿的7%,而水相占93%,電解質(zhì)都存在于水相中。間接ISE法需要稀釋液來稀釋樣本,對于高脂樣本由于脂蛋白占有大量體積,從而使測定結果出現(xiàn)假性降低。直接ISE法不需要樣本稀釋,因而測定結果不受高脂樣本的影響,臨床實際工作中以間接ISE法為主。
2)火焰分光光度法:該法是測定鈉、鉀的參考方法,其原理是以火焰作為激發(fā)光源的原子發(fā)射光譜分析法,也稱火焰發(fā)射光譜法?;鹧婀舛扔嫷姆N類和型號繁多,但基本結構相同,均由噴霧燃燒系統(tǒng)、分光系統(tǒng)和光度測量系統(tǒng)三部分組成。
噴霧燃燒系統(tǒng)包括噴霧器、燃燒器、燃料氣體和助燃氣體的供應及調(diào)節(jié)裝置,其作用是將試樣溶液霧化后與助燃氣體及燃料氣體混合,燃燒形成火焰,再利用火焰的熱能使試樣細霧脫溶劑,蒸發(fā)成氣態(tài),再解離為氣態(tài)原子,并激發(fā)發(fā)光。分光系統(tǒng)可以是一組濾光片,也可以是棱鏡或光柵單色器,其作用是從光源發(fā)出的復合光中分離出待測元素的發(fā)射光。光度測量系統(tǒng)包括檢測器、放大器及讀數(shù)裝置。含有Na+、K+等離子的溶液,由燃氣吸入霧
化室霧化燃燒。Na+、K+等離子獲得能量后,由基態(tài)原子轉變成激發(fā)態(tài)原子,激發(fā)態(tài)原子不穩(wěn)定,回到基態(tài)時發(fā)射出各自特有的波長譜線(Na+585nm、K+767nm)。各波長的光通過各自的檢測器進行檢測,信號的強度與標本中Na+、心等的濃度成正比。
(二)血清鉀
【檢測方法】和血清鈉測定一樣,血清鉀測定可通過AAs、FES、ISE或紫外可見光分光光度法進行。臨床實驗室常采用ISE和火焰發(fā)射分光光度法。
【參考區(qū)間】3.5~5.5mmol/L。
【臨床意義】見第一節(jié)鉀平衡紊亂。
【評價】見血清鈉評價內(nèi)容。
(三)血清氯
【檢測方法】測定血清氯的方法有同位素稀釋質(zhì)譜法、庫侖滴定法、硫氰酸汞比色法、ISE法、硝酸汞滴定法和酶法。同位素稀釋質(zhì)譜法是氯測定的決定性方法,臨床常用的檢測方法為ISE法。
【參考區(qū)間】96~108mmol/L。
【臨床意義】見第一節(jié)氯平衡紊亂。
【評價】血清氯分析方法主要有硫氰酸汞比色法和離子選擇電極法。
1.硫氰酸汞比色法血清中與硫氰酸汞反應形成非游離的氯化汞和游離的硫氰酸離子,硫氰酸離子再與鐵離子反應形成一種淺紅色的硫氰酸鐵復合物,在480nm處進行比色,吸光度大小與樣本中的濃度成正比,其反應式如下:
該法分析范圍為80~125mmol/L,高脂樣本會產(chǎn)生混濁而干擾測定。反應對溫度也非常敏感,吸光度隨溫度升高而增加。
2.離子選擇電極法ISE法是目前測定最常用的方法,具有簡便、快速、準確等優(yōu)點。氯電極是由氯化銀、氯化鐵一硫化汞為膜性材料制成的固體膜電極,對標本中有特殊響應。
ISE法測定K+、Na+和的電極常制備在一起,組成離子選擇電極分析儀,是臨床實驗室測定心、Na+和的最常用方法。