全自動(dòng)生化分析儀發(fā)展迅速,具有多項(xiàng)目、多樣本的處理能力,檢測(cè)速度不斷提高,但由于共用吸樣針、試劑針、攪拌棒以及比色杯,當(dāng)生化儀長期使用致其清洗能力下降、比色杯老化后引起吸附力增加、生化儀內(nèi)污垢的積聚、測(cè)試順序安排不當(dāng),且常規(guī)清洗不能有效消除交叉污染時(shí),就會(huì)增加試劑間化學(xué)污染的可能性,引起測(cè)定結(jié)果偏高或偏低[1]。在日常工作中,我們發(fā)現(xiàn)尿酸、葡萄糖試劑與肌酐 ( CR) 試劑相鄰時(shí),可造成肌酐測(cè)定結(jié)果偏高,考慮可能為試劑之間的交叉污染。為此,我們用邁瑞 800 全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),并探討了避免交叉污染的方法。
1 材料與方法
1. 1 儀器與試劑 邁瑞 800 全自動(dòng)生化分析儀。尿酸 ( 酶法) 、葡萄糖 ( 氧化酶法) 和肌酐 ( 氧化酶法) 試劑均勻?yàn)檎憬晾瞪锛夹g(shù)有限公司產(chǎn)品。
1. 2 標(biāo)本 隨機(jī)選擇 CR 測(cè)定范圍在 40 ~ 120μmol / L 和 200 ~500μmol / L 之間的血清標(biāo)本制成兩份混合人血清,分別代表低值、高值。
1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用 SPSS 11. 0 軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以 ( x ± s) 表示,采用配對(duì) t 檢驗(yàn),以 P <0. 05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2. 1 項(xiàng)目間交叉污染實(shí)驗(yàn) 用自動(dòng)生化分析儀將兩份混合人血清重復(fù)測(cè)定 20 次,單獨(dú)測(cè)定肌酐組結(jié)果分別為 ( 74 ± 7)μmol/L、( 312 ± 8) μmol/L,然后先測(cè)定尿酸后測(cè)定肌酐組結(jié)果為 ( 131 ±6) μmol/L、( 409 ± 4) μmol/L,先測(cè)定葡萄糖后測(cè)定肌酐組結(jié)果為 ( 182 ±8) μmol/L、( 528 ±5) μmol/L。先測(cè)尿酸和葡萄糖后測(cè)肌酐,其肌酐值與單獨(dú)測(cè)得肌酐值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 ( P <0. 01) 。
2. 2 交叉干擾的排除 尿酸、葡糖糖與肌酐試劑相鄰時(shí),在尿酸與肌酐、葡糖糖與肌酐之間任意穿插其他項(xiàng)目 ALT、AST、BUN ( UA - ALT - AST - BUN - CR、GLU - ALT - AST -BUN - CR) 測(cè)定肌酐,兩組低值和高值結(jié)果分別為: ( 77 ± 6)μmol/L、( 308 ± 6) μmol/L 和 ( 75 ± 5) μmol/L、 ( 318 ± 8)μmol/L,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 ( P > 0. 05) 。
3 討論
隨著全自動(dòng)生化分析儀在各級(jí)醫(yī)院的普及,給臨床檢驗(yàn)工作帶來方便,提高工作效率,但是如果由于對(duì)生化儀保養(yǎng)不當(dāng)時(shí)往往會(huì)導(dǎo)致儀器的清洗能力下降,比色杯老化后引起吸附能力下增強(qiáng),生化儀內(nèi)灰塵及污物的積聚等均會(huì)增加儀器及試劑間交叉污染的可能性,引起測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。根據(jù)多年的使用經(jīng)驗(yàn),認(rèn)為試劑間的交叉污染對(duì)測(cè)定結(jié)果影響最大,
這些干擾主要有以下幾個(gè)方面:
( 1) 試劑中含有高濃度的被干擾項(xiàng)目的待測(cè)物;
( 2) 試劑成分參與反應(yīng): 上一個(gè)試劑中含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測(cè)定的底物有作用,因而干擾下一反應(yīng)的測(cè)定結(jié)果。
( 3) 反應(yīng)進(jìn)程相同: 上一個(gè)試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對(duì)下一個(gè)項(xiàng)目的反應(yīng)進(jìn)程帶來間接的干擾,下一項(xiàng)目所測(cè)定的是前后兩個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果;
( 4) 改變了下一個(gè)測(cè)定項(xiàng)目的最適 pH 值測(cè)定環(huán)境。
在本實(shí)驗(yàn)中,尿酸、葡萄糖反應(yīng)產(chǎn)物均有過氧化氫,而肌酐測(cè)定試劑必須使用過氧化氫酶,使用如前面的尿酸、葡萄糖等 Trinders 反應(yīng)而產(chǎn)生過氧化氫的測(cè)試項(xiàng)目,測(cè)會(huì)消耗部分過氧化氫酶,導(dǎo)致肌酸和肌氨酸不能有效消除,使測(cè)定結(jié)果偏高,其次肌酐也是以 Trinders 反應(yīng)產(chǎn)生顏色改變進(jìn)行測(cè)定,必然受到尿酸、葡萄糖的帶來的嚴(yán)重干擾。當(dāng)改變儀器檢測(cè)順序,在尿酸、葡萄糖與肌酐之間任意穿插其他項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)時(shí),所得結(jié)果與對(duì)照組比較無顯著性差異。解決以上自動(dòng)生化分析儀試劑針攜帶污染所致的干擾方法有:
( 1) 安排項(xiàng)目順序時(shí)要求兩個(gè)項(xiàng)目間至少要有一個(gè)非干擾項(xiàng)目,或?qū)⒈桓蓴_項(xiàng)目放在干擾項(xiàng)目之前;
( 2) 設(shè)定試劑針、樣品針和反應(yīng)杯的補(bǔ)充清洗程序,從而大大減低試劑之間的交叉污染。
注:華南標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)網(wǎng)-國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采購平臺(tái)