【實驗器材】
(1)儀器 電子天平、燒杯、磁力攪拌器、容量瓶、滅菌過濾器、移液器及配套槍頭等。
(2)材料濾紙、稱量紙、濾膜。
(3)試劑各種抗生素、新鮮制備的三蒸水或Hank’s液等。
【操作方法與步驟】
(一)青霉素、鏈霉素(雙抗)液的配制和使用
(1)用l0mL Hank’s液或三蒸水溶解100萬U的硫酸鏈霉素,用8 mL 硫酸鏈霉素液溶解80萬U青霉素粉,即成每毫升青霉素、鏈霉素各10萬U的母液。
(2)使用時,在100mL培養(yǎng)基內(nèi)加母液0.1 mL,則培養(yǎng)基內(nèi)青霉素、鏈霉素最終使用濃度為每毫升100U。
(二)卡那霉素液的配制和使用
(1)將1瓶卡那霉素(50 000μg/瓶)溶于5 mL Hank’s液中,即成10 000μg/mL的母液。
(2)使用時每100mL培養(yǎng)基內(nèi)加0.5 mL母液,即每毫升培養(yǎng)液內(nèi)最終使用濃度為50μg/mL。
(三)制霉菌素液的配制
因制霉菌素不能溶于水,故只能制成5 000μg/mL的懸液,使用時每100 mL培養(yǎng)基內(nèi)加0.5 mL懸液,即每毫升營養(yǎng)液內(nèi)含25μg的制霉菌素。
配制的制霉菌素宜用小瓶分裝,低溫凍存保存,用時每瓶一次用完。