根據(jù)分離機(jī)制的不同，高效液相色譜法可分為下述幾種主要類型：
1.液—液分配色譜法（Liquid-liquidPartitionChromatography）及化學(xué)鍵合相色譜（ChemicallyBondedPhaseChromatography）
流動(dòng)相和固定相都是液體。流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個(gè)明顯的分界面。當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí)，服從于下式：
式中，cs—溶質(zhì)在固定相中濃度;cm--溶質(zhì)在流動(dòng)相中的濃度;Vs—固定相的體積;Vm—流動(dòng)相的體積。LLPC與GPC有相似之處，即分離的順序取決于K，K大的組分保留值大;但也有不同之處，GPC中，流動(dòng)相對(duì)K影響不大，LLPC流動(dòng)相對(duì)K影響較大。
a.正相液—液分配色譜法（NormalPhaseliquidChromatography）:流動(dòng)相的極性小于固定液的極性。
b.反相液—液分配色譜法（ReversePhaseliquidChromatography）:流動(dòng)相的極性大于固定液的極性。
c.液—液分配色譜法的缺點(diǎn)：盡管流動(dòng)相與固定相的極性要求完全不同，但固定液在流動(dòng)相中仍有微量溶解;流動(dòng)相通過拾步便民新昌色譜柱時(shí)的機(jī)械沖擊力，會(huì)造成固定液流失。上世紀(jì)70年代末發(fā)展的化學(xué)鍵合固定相（見后），可克服上述缺點(diǎn)?，F(xiàn)在應(yīng)用很廣泛（70~80%）。
2.液—固色譜法
流動(dòng)相為液體，固定相為吸附劑（如硅膠、氧化鋁等）。這是根據(jù)物質(zhì)吸附作用的不同來進(jìn)行分離的。其作用機(jī)制是：當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱時(shí)，溶質(zhì)分子（X）和溶劑分子（S）對(duì)吸附劑表面活性中心發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)吸附（未進(jìn)樣時(shí)，所有的吸附劑活性中心吸附的是S），可表示如下：
Xm+nSa======Xa+nSm
式中：Xm--流動(dòng)相中的溶質(zhì)分子;Sa--固定相中的溶劑分子;Xa--固定相中的溶質(zhì)分子;Sm--流動(dòng)相中的溶劑分子。
當(dāng)吸附競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)達(dá)平衡時(shí)：
K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]
式中：K為吸附平衡常數(shù)。[討論：K越大，保留值越大。]
3.離子交換色譜法（Ion-exchangeChromatography）
IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進(jìn)行可逆交換，依據(jù)這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。
以陰離子交換劑為例，其交換過程可表示如下：
X-（溶劑中）+（樹脂-R4N+Cl-）===（樹脂-R4N+X-）+Cl-（溶劑中）
當(dāng)交換達(dá)平衡時(shí)：
KX=[-R4N+X-][Cl-]/[-R4N+Cl-][X-]
分配系數(shù)為：
DX=[-R4N+X-]/[X-]=KX[-R4N+Cl-]/[Cl-]
[討論：DX與保留值的關(guān)系]
凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法來進(jìn)行分離。
4.離子對(duì)色譜法（IonPairChromatography）
離子對(duì)色譜法是將一種（或多種）與溶質(zhì)分子電荷相反的離子（稱為對(duì)離子或反離子）加到流動(dòng)相或固定相中，使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子對(duì)化合物，從而控制溶質(zhì)離子的保留行為。其原理可用下式表示：
X+水相+Y-水相===X+Y-有機(jī)相
式中：X+水相--流動(dòng)相中待分離的有機(jī)離子（也可是陽離子）;Y-水相--流動(dòng)相中帶相反電荷的離子對(duì)（如氫氧化四丁基銨、氫氧化十六烷基三甲銨等）;X+Y---形成的離子對(duì)化合物。
當(dāng)達(dá)平衡時(shí)：
KXY=[X+Y-]有機(jī)相/[X+]水相[Y-]水相
根據(jù)定義，分配系數(shù)為：
DX=[X+Y-]有機(jī)相/[X+]水相=KXY[Y-]水相
[討論：DX與保留值的關(guān)系]
離子對(duì)色譜法（特別是反相）發(fā)解決了以往難以分離的混合物的分離問題，諸如酸、堿和離子、非離子混合物，特別是一些生化試樣如核酸、核苷、生物堿以及藥物等分離。
5.離子色譜法（IonChromatography）
用離子交換樹脂為固定相，電解質(zhì)溶液為流動(dòng)相。以電導(dǎo)檢測(cè)器為通用檢測(cè)器，為消除流動(dòng)相中強(qiáng)電解質(zhì)背景離子對(duì)電導(dǎo)檢測(cè)器的干擾，設(shè)置了抑制柱。試樣組分在分離柱和抑制柱上的反應(yīng)原理與離子交換色譜法相同。
以陰離子交換樹脂（R-OH）作固定相，分離陰離子（如Br-）為例。當(dāng)待測(cè)陰離子Br-隨流動(dòng)相（NaOH）進(jìn)入色譜柱時(shí)，發(fā)生如下交換反應(yīng)（洗脫反應(yīng)為交換反應(yīng)的逆過程）：
抑制柱上發(fā)生的反應(yīng)：
R-H++Na+OH-===R-Na++H2O
R-H++Na+Br-===R-Na++H+Br-
可見，通過抑制柱將洗脫液轉(zhuǎn)變成了電導(dǎo)值很小的水，消除了本底電導(dǎo)的影響;試樣陰離子Br-則被轉(zhuǎn)化成了相應(yīng)的酸H+Br-，可用電導(dǎo)法靈敏的檢測(cè)。
離子色譜法是溶液中陰離子分析的最佳方法。也可用于陽離子分析。
6.空間排阻色譜法（StericExclusionChromatography）
空間排阻色譜法以凝膠（gel）為固定相。它類似于分子篩的作用，但凝膠的孔徑比分子篩要大得多，一般為數(shù)納米到數(shù)百納米。溶質(zhì)在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進(jìn)行分離，而是按分子大小進(jìn)行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質(zhì)的流動(dòng)力學(xué)體積或分子大小有關(guān)。試樣進(jìn)入色譜柱后，隨流動(dòng)相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過。在試樣中一些太大的分子不能進(jìn)入膠孔而受到排阻，因此就直接通過柱子，首先在色譜圖上出現(xiàn)，一些很小的分子可以進(jìn)入所有膠孔并滲透到顆粒中，這些組分在柱上的保留值最大，在色譜圖上最后出現(xiàn)。
