嘌呤堿或嘧啶堿具有共軛雙鍵，使核苷酸和核酸在紫外光區(qū)具有特征性的吸收光譜，最大吸收峰在260nm。比色杯光徑1cm，波長260nm，1個吸光度值(A)相當于50μg/mL雙螺旋DNA；40μg/mL單螺旋DNA或RNA；20μg/mL寡核苷酸。
(一)DNA的濃度測定
1.取DNA溶液l0μl，加雙蒸餾水600μl(即稀釋61倍)。
2．用雙蒸餾水調(diào)零，測定260nm和280nm的吸光度值(A260，A280)。
3．DNA濃度（μg/μl）=（A260×50×61）÷1000
4．DNA的純度A260/A280的比值應(yīng)大于1．7。若樣品中含有蛋白質(zhì)(吸收峰在280nm)等雜質(zhì)時，比值下降，應(yīng)重新純化。有時測定A230，A260/A230的比值應(yīng)大于2．0，如比值太小，說明樣品中殘存酚等有機雜質(zhì)。
5．DNA溶液需經(jīng)一定比例稀釋，不可太濃。否則，因溶液黏稠，加樣器不易吸準。
(二)RNA的濃度測定
1．取RNA(溶于5g/L。SDS溶液中)溶液10μl，加入三蒸餾水500μl中(稀釋5l倍)。
2．將5g/LSDS用三蒸餾水做51倍稀釋，用此液調(diào)零，測定RNA稀釋液在260nm和280nm的吸光度(A260、A280)。
3．RNA濃度（μg/μl）=(A260×40×51)÷1000
4．RNA純度純的RNA，A260/A280=2.0。由于所用的標本不同，比值在1．7～2．0之間可以接受。如低于此范圍，往往是由于蛋白質(zhì)的污染。有時，RNA樣品的A260/A280可大于2.0。低于此值則表示有異硫氰酸胍的污染。應(yīng)再經(jīng)異戊醇沉淀，以除去小分子胍類的污染。
