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      技術(shù)中心

      科普:血清酶類

      • 發(fā)布日期:2016/9/24 13:47:15 閱讀次數(shù):1552
      • (一)血清轉(zhuǎn)氨酶及其同工酶

        轉(zhuǎn)氨酶或稱氨基轉(zhuǎn)移酶是一組催化氨基在氨基酸與-酮酸問(wèn)轉(zhuǎn)移的酶類,參與體內(nèi)多種非必需氨基酸合成,血清中轉(zhuǎn)氨酶濃度的測(cè)定對(duì)于多種疾病的診斷和病情監(jiān)測(cè)具有重要作用。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase,ALT)和(天)門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransfeiase,AS2)是其中最重要的兩種,前者俗稱為谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GP'I),后者俗稱為谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)。

        ALT大量存在于肝臟組織中,其次為腎、心、骨骼肌等。血清ALT活性升高,通常表示肝臟損傷。ALT有兩種不同活性的同工酶Q(ALTs)和D(ALTm),分別存在于細(xì)咆質(zhì)及線粒體,后者的活性為前者的16倍。肝細(xì)胞壞死血清中以ALTm為主。

        AST廣泛存在于多種器官中,按含量多少頇序分布于心、肝、骨骼肌和腎等,旰中70%存在于肝細(xì)胞線粒體中。AST有兩種同工酶:ASTs和ASTm,分別存在于可溶性的細(xì)胞質(zhì)

        乏線粒體。細(xì)胞輕度損傷時(shí)ASTs顯著升高;而嚴(yán)重?fù)p傷時(shí),血清中則出現(xiàn)大量ASTm。正常血清所含AST的同工酶主要為ASTs,但在病理狀態(tài)下,如細(xì)胞壞死,則血清中以ASTm為主。

        【檢測(cè)方法】轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定方法有許多種,其中以賴氏法最常用,由于此法操作簡(jiǎn)便、主并,一些小型實(shí)驗(yàn)室仍在使用。目前,國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室多采用連續(xù)監(jiān)測(cè)法進(jìn)行測(cè)定。

        ALT速率法測(cè)定中酶偶聯(lián)反應(yīng)式為:

        上述偶聯(lián)反應(yīng)中,NADH的氧化速率與標(biāo)本中酶活性成正比,可在340nm處檢測(cè)吸光復(fù)下降速率。根據(jù)線性反應(yīng)期吸光度下降速率(一△A/min),計(jì)算出ALT、AST的活力單位。

        【參考區(qū)間】連續(xù)監(jiān)測(cè)法健康成人參考區(qū)間為:ALT:男性為5~40U/L;女性為5~35U/L(37℃):AST:8~40U/L(37℃)。

        【臨床意義】ALT是反映肝損傷的一個(gè)很靈敏的指標(biāo),臨床上主要用于肝臟疾病的診斷。

        急性肝損害時(shí),如各種急性病毒性肝炎、藥物或酒精中毒性肝炎,血清ALT水平可在臨末癥狀(如黃疸)出現(xiàn)之前就急劇升高,且ALT>AST。一般而言,急性肝炎時(shí)血清ALT高低與臨床病情輕重相平行,且往往是肝炎恢復(fù)期最后降至正常的酶,是判斷急性肝炎是否恢復(fù)的一個(gè)很好的指標(biāo)。

        計(jì)算DeRitis比值,即AST/ALT之比,對(duì)于急、慢性肝炎的診斷和鑒別診斷以及判斷肝炎的轉(zhuǎn)歸也特別有價(jià)值。正常約為1.15,如比值有升高傾向,應(yīng)注意有無(wú)發(fā)展為慢性肝炎的可能,此比值對(duì)判斷肝炎的轉(zhuǎn)歸特別有價(jià)值。急性肝炎時(shí)DeRitis比值<l,肝硬化時(shí)DeRitis比值≥2,肝癌時(shí)DeRitis比值≥3。特別注意的是,重癥肝炎時(shí)由于大量肝細(xì)胞壞死,血中ALT逐漸下降,而膽紅素卻進(jìn)行性升高,出現(xiàn)所謂“酶膽分離”現(xiàn)象,常是肝壞死的前兆。

        ALT廣泛存在于各組織中,機(jī)體器官有實(shí)質(zhì)性損害時(shí),ALT均可增高。發(fā)生膽道疾病對(duì),肝細(xì)胞內(nèi)ALT的一部分可通過(guò)肝細(xì)胞膜,經(jīng)肝竇狀隙進(jìn)入血液,故當(dāng)各種原因引起膽道梗阻時(shí),可致ALT中度升高,梗阻緩解后1~2周即可恢復(fù)正常。其他肝膽疾病如膽石癥、膽囊炎、肝癌和肝淤血時(shí)也可升高。但一般而言,這些疾病ALT升高很少超過(guò)正常上限的10倍,常以400U/L為界,超過(guò)此值絕大多數(shù)可診斷為肝炎。

        血清AsT活性升高,多來(lái)自心肌或肝臟損傷;腎臟或胰腺細(xì)胞損傷時(shí),也可出現(xiàn)很高的AST活性。慢性肝炎特別是肝硬化時(shí),AsT升高程度超過(guò)ALT。膽道疾病時(shí)AST亦可升高(表8-4)。

        【評(píng)價(jià)】連續(xù)監(jiān)測(cè)法是IFCC的推薦方法,是目前公認(rèn)的國(guó)際參考方法。由于肝富含ALT和AST,并主要存在于旰細(xì)胞內(nèi),當(dāng)肝細(xì)胞變性壞死時(shí),可引起血清中轉(zhuǎn)氨酶顯著升高,因此,血清轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)一直被認(rèn)為是反映肝細(xì)胞損害的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn);進(jìn)一步檢測(cè)AST/ALT和AST同工酶,可提高血清轉(zhuǎn)氨酶測(cè)定的診斷和鑒別診斷價(jià)值。

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