糖精是甜味劑，其學(xué)名為鄰一磺酰苯甲酰亞胺，因糖精難溶于水，故食品生產(chǎn)中常用其鈉鹽，即糖精鈉。糖精鈉的分子式為C7H4O3NSNa·2H2O。糖精鈉無營養(yǎng)價值。其致癌作用一直都有爭議，考慮到人體安全性，加之糖精對人體無營養(yǎng)，規(guī)定嬰幼兒食品、病人食品和大量食用主食都不得使用。M(C7H4O3NSNa·2H2O)=241．19。
高效液相色譜法
1．儀器
HPLC儀(具紫外檢測器)。
2．試劑
①甲醇。
②0．02mol·L-1乙酸銨液：取1．54g乙酸銨，加水溶解并定容至1L，經(jīng)0．45μm濾膜過濾。
③糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)貯存液(1mg·mL-1)：稱取經(jīng)120oC烘烤4h的無水糖精鈉0．0851g，用水溶解，并定容至100mL，經(jīng)0．45μm濾膜過濾。
④糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(O．1mg·mL-1)。
⑤NH3·H2O(1+1)。
⑥0．08％NaOH液。
⑦HCl。
⑧0．2％CuSO4。
⑨4％NaOH液。
⑩無水乙醚。
3．儀器工作條件
①不銹鋼色譜柱：250mm×4．6mm，內(nèi)裝粒徑Y(jié)WGC1810μm，或100mm×8mm，內(nèi)裝粒徑RADIALPAKμBONDAPAKl0μm。
②流動相：甲醇+0．02mol／L乙酸銨(54-95)。
③紫外檢測器(波長230nm)。．
④靈敏度0．2AUFS。
⑤流速1．2mL／min。
⑥進(jìn)樣量10μL。
4．標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
分別吸取糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(O．1mg·mL-1)0．0mL、0．2mL、0．4mL、0．6mL、0．8mL、1．0mL于10mL容量瓶中，用(1+1)氨水調(diào)pH≈7，用水定容至刻度，搖勻，分別取10pL注人HPLC儀，以峰面積為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
5．檢測步驟
①果汁、酒類：準(zhǔn)確稱取果汁類樣液(10g)于燒杯中，用NH3·H2O(1+1)調(diào)pH=7，移入l0mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻，轉(zhuǎn)移此溶液于離心管中，離心，上清液過濾(0．45pm濾膜)，取濾液10mg·mL-1L注入HPLC儀。
②固體、半固體食品：準(zhǔn)確稱取(25g)固體、半固體樣于透析膜中，加0．08％NaOH60mL，調(diào)成糊狀，將透析袋口扎緊，放于盛有0．08％NaOH200mL的燒杯中透析，過夜。在透析液燒杯中，加(1+1)HCl0．8mL，使呈中性，0．2％CuSO4液15mL、4％NaOH液8mL，混勻，30min后過濾。濾液100mL用水定容至250mL于分液漏斗中。加稀HCl(I+I)，用無水乙醚30mL提取殘?jiān)?次，合并乙醚提取液于K-D濃縮器中，濃縮至干。加水溶解，用NH3·H2O(1+1)調(diào)PH≈7，移于10mL容量瓶中用水定容至刻度，用0．45μm濾膜過濾。取濾液10μL注入HPLC儀。
6．計(jì)算
食品中糖精鈉含量(g／kg)=(Cs*1000)/[m(V2/V1)*1000]
式中Cs——樣品峰面積查標(biāo)準(zhǔn)曲線對應(yīng)含量，mg；
m——樣品質(zhì)量，g；
V1——樣品液體積，mL；
V2——進(jìn)樣體積，mL。
7．說明
①樣品如為碳酸飲料類，應(yīng)先在水浴加溫除CO2；如為配制酒類應(yīng)，先在水浴加熱除乙醇，再用氨水調(diào)pH。
②固體、半固體樣品為蜜餞、糕點(diǎn)、醬菜、冷飲等。
