(1)提出問題
色譜分析中利用保留時(shí)間定性是最基本的定性方法，其基本依據(jù)是：相同的物質(zhì)在同一色譜條件下應(yīng)該有相同的保留時(shí)間。但是，相反的結(jié)論卻不成立，即在相同色譜條件下，具有相同保留時(shí)間的兩個(gè)色譜峰不一定是同一物質(zhì)。
利用已知物直接對(duì)照法定性是一種最簡(jiǎn)單、最常用的定性方法，即將未知樣品和已知標(biāo)準(zhǔn)物在同一根色譜柱上，用相同的色譜條件分析，獲得色譜圖后進(jìn)行對(duì)照比較，如果未知樣品中的某個(gè)峰與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間相同，則可初步推測(cè)是該化合物，但是否肯定是該化合物?該如何避免假陽性結(jié)果?
(2)分析原因
分析中經(jīng)常會(huì)碰到復(fù)雜基質(zhì)樣品，由于雜質(zhì)成分與待測(cè)化合物性質(zhì)相似或接近，就可能在色譜行為上表現(xiàn)一致，反映在色譜圖中，就是出現(xiàn)與待測(cè)化合物標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間一致的色譜峰，可能是單一組分峰，也可能是多組分重疊峰。
對(duì)于這些峰，僅靠保留時(shí)間定性，我們經(jīng)常會(huì)根據(jù)保留時(shí)間一致判定為目標(biāo)化合物，就容易出現(xiàn)誤判。出現(xiàn)這種情況，多半是樣品未凈化完全、待測(cè)化合物有基質(zhì)效應(yīng)等，尤其在含硫化合物較多的蔥、姜、蒜樣本的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)中經(jīng)常出現(xiàn)。
(3)解決方案
在檢測(cè)中，避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果的方法有：
①樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)比保留時(shí)間并測(cè)定加標(biāo)回收率，看色譜峰及面積是否變化；
②改變色譜柱升溫程序，看樣品中該色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間有無差別變化；
③利用兩根不同極性的色譜柱，或不同類型檢測(cè)器進(jìn)行雙柱、雙檢測(cè)器確證；
④采用GC—MS進(jìn)行確證，利用保留時(shí)間和質(zhì)譜圖雙重定性，還可結(jié)合更嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臄?shù)據(jù)分析方法AMDIS進(jìn)行峰形對(duì)照確證，以及二級(jí)質(zhì)譜MS／MS確證；
⑤繼續(xù)優(yōu)化前處理，進(jìn)一步去除干擾物后，再分析查看保留時(shí)間、峰形等有無變化。
(4)案例分析
佟玲等用GC—NPD分析甘藍(lán)中氧化樂果時(shí)，發(fā)現(xiàn)樣品峰與標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰保留時(shí)間一致，為陽性結(jié)果。但是采用GC—CI—MS／MS分析，選取氧化樂果準(zhǔn)分子離子峰m／z214為母離子，子離子為m／z183和m／z196，結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣品色譜峰中不含氧化樂果的特征子離子，可確認(rèn)樣品為假陽性。
這種情況尤其在蔥、姜、蒜等復(fù)雜基質(zhì)檢測(cè)時(shí)常見，由于基質(zhì)復(fù)雜，前處理時(shí)凈化不完全，基質(zhì)中和待測(cè)化合物相似的組分不易除去，很容易造成假陽性，利用二級(jí)質(zhì)譜確證能避免假陽性結(jié)果。
