建立了肉制食品中5種鄰苯二甲酸酯類(lèi)增塑劑(PAEs)含量的檢測(cè)方法。樣品用正己烷提取,C18柱分離,柱溫35·0℃,乙腈-水為流動(dòng)相梯度洗脫,流速1·0mL/min,紫外檢測(cè)波長(zhǎng)226nm。5種PAEs分離特異性好,在0·02~10μg/mL之間均具有較好的線(xiàn)性關(guān)系,檢出限在4·4~13·8ng/mL之間,高、中、低3水平的回收率均在79·5%~102·0%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均在1·1%~14%之間。方法適用于肉制食品中鄰苯二甲酸酯類(lèi)的檢測(cè)。
關(guān)鍵詞:鄰苯二甲酸酯;高效液相色譜;肉制食品
食品容器和包裝材料增塑劑包括鄰苯二甲酸酯類(lèi)(PAEs)、己二酸酯類(lèi)(AEs)等。增塑劑與塑料間并沒(méi)有嚴(yán)密的化學(xué)結(jié)合鍵,故很容易進(jìn)入環(huán)境。近年的研究表明:PAEs和AEs在體內(nèi)長(zhǎng)期累積,可致畸、致癌和致突變[1,2]。因此,增塑劑的分析檢測(cè)受到重視,尤以PAEs為研究對(duì)象居多。目前,PAEs的檢測(cè)技術(shù)主要采用薄層色譜法[3]、氣相色譜法[4~6]、液相色譜法[7~14]、氣-質(zhì)聯(lián)用法[15,16],樣品處理技術(shù)主要有液-液萃取[3,8,14,15]、固相萃取[4,5,9,11,16]以及固相微萃取[6,7,12,15]等,涉及的基體主要為PVC塑料[3,4,6,15]、環(huán)境樣品(如水、泥土)[5,8,13,16]、組織和血漿[7,8,10,15]、食品[12,14]等。食品因直接被攝入而危害更大,報(bào)道過(guò)的研究對(duì)象主要包括:水產(chǎn)品、牛奶、食用油等。肉制食品的脂肪含量高,PAEs在其中的溶出程度尤為嚴(yán)重,但至今未見(jiàn)相關(guān)檢測(cè)方法報(bào)道。
本文以鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸正二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸正二辛酯(DOP)、鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)、鄰苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)等5種PAEs為研究對(duì)象,建立了高效液相色譜法測(cè)定肉制食品中PAEs的方法。方法重現(xiàn)性好,準(zhǔn)確度高,可用于肉制食品中此類(lèi)物質(zhì)的測(cè)定,也可用于生產(chǎn)企業(yè)的質(zhì)量控制。
1實(shí)驗(yàn)部分
1.1儀器與試劑
戴安P680C高效液相色譜儀,包括:P680型四元梯度泵,TCC-100型柱溫箱,ASI-100型自動(dòng)進(jìn)樣器,UVD170U型紫外檢測(cè)器,Chromeleon色譜工作站;AB104-N型電子天平;XHF-D型高速分散器;SK-1型渦旋混勻器;DS180A型超聲波清洗機(jī);HeraeusPrimoR高速冷凍離心機(jī);D10-12型氮?dú)獯祾邇x;HealForcePW超純水系統(tǒng)。DEP、DBP、DEHP、DOP標(biāo)準(zhǔn)品(Sigma-Aldrich),BBP標(biāo)準(zhǔn)品(TCI),乙腈(HPLC級(jí))、正己烷(Fisher),水為超純水。
1.2色譜條件
色譜柱:PhenomenexLunaC18柱(250mm×4.6mmi.d.,5μm);預(yù)柱:PhenomenexC18柱(4mm×3mm,5μm);紫外檢測(cè)波長(zhǎng):226nm;柱溫:35·0℃;進(jìn)樣體積20μL;流動(dòng)相:乙腈-水;流速:1·0mL/min;梯度洗脫。
1.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
分別稱(chēng)取DEP、BBP、DBP、DEHP、DOP標(biāo)準(zhǔn)品各0·0500g,分別用乙腈定容于50mL容量瓶中,配成1mg/mL的5種PAEs的儲(chǔ)備液。準(zhǔn)確移取5種PAEs的儲(chǔ)備液各100·0μL,置于同一10mL容量瓶中,用V(乙腈)∶V(水)=75∶25的混合溶液定容,配成10·0μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用溶液。再用水逐級(jí)稀釋,配成2·0、1·0、0·20、0·10、0·020、0·010μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用溶液。
1.4樣品處理
準(zhǔn)確稱(chēng)取已切碎的火腿腸0.5g于試管中,加入正己烷2mL,勻漿,渦旋振搖3min,超聲提取15min,在-10℃下10000r/min離心10min,取清液;同法再萃取1次,合并2次清液,45℃下氮?dú)饬鞔蹈?用乙腈0.5mL溶解殘?jiān)?經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后,進(jìn)樣。以生產(chǎn)日期不超過(guò)15天,距離表面1cm以上的內(nèi)層肉制品作為空白。
2結(jié)果與討論
2.1色譜條件的選擇
PAEs在205、226和272nm處有3個(gè)特征吸收峰,吸收強(qiáng)度依次增大,但272nm處雜峰干擾較多,綜合考慮吸收強(qiáng)度及干擾因素,選擇226nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。
以純乙腈作為流動(dòng)相時(shí),BBP和DBP、DEHP和DOP兩兩未能達(dá)到完全分離,增加流動(dòng)相中水的含量,5種PAEs能完全分離,但DEHP和DOP的出峰時(shí)間增長(zhǎng),當(dāng)以V(乙腈)∶V(水)=75∶25的流動(dòng)相等度洗脫時(shí),DOP的出峰時(shí)間超過(guò)了50min,故考慮采用梯度洗脫。在如表1所示條件下5種PAEs完全分離,出峰時(shí)間控制在22min之內(nèi)。
2.2樣品處理?xiàng)l件的選擇
肉制食品所含成分復(fù)雜,目前主要采用有機(jī)溶劑液相萃取。嘗試采用乙腈、乙醇、乙酸乙酯、正己烷等溶劑,正己烷效果最好。因肉制食品含有大量油脂,在萃取PAEs過(guò)程中油脂易被正己烷同時(shí)提取,對(duì)樣品測(cè)試產(chǎn)生干擾?？紤]DEP、BBP、DBP、DEHP、DOP的凝固點(diǎn)分別為:-40℃、-35℃、-35℃、-55℃、-25℃,而大部分油脂尤其是肉制食品中的主要油脂動(dòng)物脂肪,在-8℃以上即發(fā)生凝固,故在-10℃下高速冷凍離心,可除去大部分油脂,減少干擾[14]。
摘自：中國(guó)分析儀器網(wǎng)
